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使用叶绿素测定仪如何进行实验

发布时间:2019-06-04浏览:386次

  叶绿素测定仪是用来测量叶绿素含量的仪器,叶绿素测定仪测量时间快速,LCD直接显示叶绿素值,30个数据,自动计算并显示平均值。
  实验准备
  (一)材料:新鲜(或烘干)的植物叶片。
  (二)仪器设备:1. 分光光度计;2. 电子顶载天平(感量0.01g);3. 研钵;4. 棕色容量瓶;5. 小漏斗;6. 定量滤纸;7. 吸水纸;8. 擦境纸;9. 滴管。
  (三)试剂:96%乙醇(或80%丙酮);石英砂;碳酸钙粉。
  实验步骤
  1. 取新鲜植物叶片(或其它绿色组织)或干材料,擦净组织表面污物,剪碎(去掉中脉),混匀。
  2. 称取剪碎的新鲜样品0.2g,共3份,分别放入研钵中,加少量石英砂和碳酸钙粉及2~3ml95%乙醇,研成均浆,再加乙醇10ml,继续研磨至组织变白。静置3~5min。
  3. 取滤纸1张,置漏斗中,用乙醇湿润,沿玻棒把提取液倒入漏斗中,过滤到25ml棕色容量瓶中,用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次,后连同残渣一起倒入漏斗中。
  4. 用滴管汲取乙醇,将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。后用乙醇定容至25ml,摇匀。
  5. 把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内。以95%乙醇为空白,在波长665nm、649nm下测定吸光度。
  实验结果计算
  将测定得到的吸光值代入下面的式子:Ca=13.9665-6.88A649;Cb=24.96A649-7.32A665。据此即可得到叶绿素a和叶绿素b的浓度(Ca、Cb:mg/L),二者之和为总叶绿素的浓度。后根据下式可进一步求出植物组织中叶绿素的含量:
  叶绿素的含量(mg/g)= [叶绿素的浓度×提取液体积×稀释倍数]/样品鲜重(或干重)。

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